美国职业足球大联盟（英文：Major League Soccer，缩写：MLS），是美国及加拿大顶级足球联赛。MLS由二十三支美国球队及三支加拿大球队组成。赛季为三月至十二月，每支球队进行三十四场常规赛，胜者赢得支持者盾。东西部各七支常规赛战绩最佳的球队晋级季后赛，胜者赢得大联盟杯。MLS成立于1993年。1996年举行首届赛事。相较于由独立运作的各队所组成的联盟，MLS采单一实体架构（single-entity）运行，每一支球队都为联盟的投资者所有及控制。MLS为封闭会员制，为世上少数没有升降级制度的足球联盟。
美国职业足球大联盟筹建于1993年，联赛于1996展开，创始队伍是十支，分为东西两大联盟，大联盟元年的参赛球队是：
东部联盟：哥伦布机员，华盛顿特区联，新英格兰革命，纽约大都会明星和坦帕湾反叛 。
西部联盟：科罗拉多急流，达拉斯燃烧，堪萨斯城巫师，洛杉矶银河和圣何塞地震。
1998年联盟扩充到12支球队，增加了西部的芝加哥火焰和东部的迈阿密联合。2000年联盟重划区域分为东区，中区和西区，芝加哥，坦帕湾，达拉斯和哥伦布被移到中部赛区。2001年两支佛州球队迈阿密联合和坦帕湾反叛解散了，联盟又重回10支队伍，联盟也回到了东西两区的模式。2004赛季的到来，联盟扩充了位于犹他盐湖城的皇家盐湖城和美国芝华士，其中美国芝华士和洛杉矶银河共用一个主场Home Depot Center，这两支球队被安排在西部赛区，而堪萨斯城巫师被移到东区。2005赛季后圣何塞地震迁往休斯敦，后改名为休斯敦1836，不过球队现已更名为休斯敦迪纳摩。2006年红牛公司收购纽约大都会明星将队名改为纽约红牛。2007年联盟扩充了多伦多。2008年圣何塞地震重新加盟大联盟。2009年联盟扩充了西雅图海湾人足球俱乐部。2010年联盟扩充了费城联合。2011年联盟再次扩军，低级别联赛的温哥华白帽，波特兰伐木工加入，整个联盟扩军到18支球队。堪萨斯城巫师更名为堪萨斯城竞技。2012赛季，蒙特利尔冲击也加入美国足球大联盟成为第18名成员。2015年，奥兰多城加入大联盟；英超曼彻斯特城和美职棒劲旅纽约洋基合作组建的纽约城加入大联盟成为第20支球队；美国芝华士退出大联盟，堪萨斯城竞技回归到西区。2017年，亚特兰大联、明尼苏达联加入大联盟，分别进入联盟东区与西区。2018年，洛杉矶FC加入美国足球大联盟，成为第23支联盟球队。2018年1月，洛杉矶FC、田纳西州的球队纳什维尔以及贝克汉姆组建的迈阿密FC加入美国足球大联盟，大联盟球队扩充至25支。2018年5月，美国职业足球大联盟MLS首席长官唐·加伯正式对外确认，俄亥俄州球队辛辛那提FC将在2019赛季正式加入大联盟。同时，纳什维尔与迈阿密将在2020赛季开始参加联盟赛事。联盟球队总数将扩充为26支。
美职联一共有 26 队参赛，分为“东部”及“西部”，东部有 14 队，西部有 12 队。
联赛（常规赛）每队赛34场，但并非像世界大部分足球联赛般采用主客双循环赛制。2019年赛季每队对同岸区的球队进行主客各一场的双循环赛，但对另一岸区的球队则只会对战一场。2020年赛季仍安排每队对同岸区的球队进行双循环赛，但跟另一岸区则只会对十三队中的其中十队（各一场比赛）。
胜方得3分，平局各得1分，负方0分。但在大联盟创建之时，比赛如出现平局均采用独特的五回合35码单刀球决胜负。进攻球员在禁区外开始运球，必须在5秒钟内将球射入对方的球门，门将则可以用出击的方式阻挡对方得分。35码单刀球胜方于联赛榜得1分，输掉的队伍没有分。可是独特的规则没有吸引美国观众的眼光，反使得喜欢传统足球的球迷远离了大联盟，所以大联盟1999年将平局后的单刀球制度取消。2000-2003设置了加时黄金进球模式（如果10分钟内还没有进球就以平局收场），2004取消了黄金进球模式，以传统的90分钟平局各取1分结束比赛。
如果发生同分，会依照总胜场数、总进球数差、总进球数、纪律分数、客场成绩、主场成绩、抽签做出排名。
联赛积分最高球队（即常规赛冠军）可获颁支持者盾。支持者盾得主、支持者盾以外的另一常规赛分区冠军以及大联盟杯冠军可获得来季中北美洲及加勒比海联赛冠军杯参赛资格（加拿大球队不能经美职联取得中北美及加勒比海联赛冠军杯席位，他们须经由加拿大足球锦标赛取得参赛资格；其位置将顺序给予常规赛次高积分的美国球队）。至于中北美及加勒比海联赛冠军杯的第4个美国席位则由美国公开杯冠军所取得。
由2012年开始，美国球队自动进入美国公开杯第三轮赛事，2014年起则改为直接进入第四轮赛事。三支加拿大球队则参加加拿大足球锦标赛。
未能得到中北美及加勒比海联赛冠军杯席位的球队中，常规赛成绩最好的四支东部及四支西部球队可获得来年参加美墨联赛杯的资格。
大联盟不设升降级制度。由于俱乐部以加盟形式进入大联盟，所以唯一加入的方法就是通过申请并支付巨额加盟费，再经大联盟官方及联盟内的俱乐部批准后始能加入。
大联盟设立薪金上限，但在2006年通过新例，给予每队一个“指定球员”名额：该名球员的薪金中，只有四十万美元将被计算在薪金上限中，其余的由球队东主自行支付。该例原以吸引一些如贝克汉姆等球星转投大联盟为目的（因此通过时被戏称为“贝克汉姆条例”）。结果贝克汉姆真的成为大联盟的第一位“指定球员”。
大联盟在季中会设立明星赛，初期由东部联盟明星队对西部联盟明星队，后来改为大联盟明星队与另一海外球队对垒。（近年多为大联盟明星队与英超球队对垒）
跟其他北美运动联赛一样，足球大联盟于联赛（常规赛）完成后立即展开季后赛，季后赛冠军奖杯为大联盟杯。一般而言，季后赛冠军会被称为该赛季的总冠军，而非联赛积分最高的球队。常规赛东部联盟及西部联盟的头七名可进入季后赛，其中两个分区冠军可直接进入第二轮赛事。季后赛赛事由2019年赛季起由主客场制改为单场淘汰制。
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